Для оптимизации разделения в капиллярном зонном электрофорезе используются такие параметры, как тип и _____ буферного раствора

ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ РАЗДЕЛЕНИЯ В КАПИЛЛЯРНОМ ЗОННОМ ЭЛЕКТРОФОРЕЗЕ ИСПОЛЬЗУЮТСЯ ТАКИЕ ПАРАМЕТРЫ, КАК ТИП И _____ БУФЕРНОГО РАСТВОРА
1) полярность
2) напряжение
3) температура
4) концентрация (+)

В капиллярном зонном электрофорезе очень важно правильно подобрать не только состав, но и концентрацию буферного раствора. От нее зависят ионная сила, электропроводность, величина электрофоретической подвижности аналитов и скорость электроосмотического потока. При слишком низкой концентрации буфера пики становятся размытыми , ухудшается воспроизводимость и возрастает влияние изменений pH. При слишком высокой — растёт ток, капилляр перегревается, появляются искажения пиков и снижается эффективность разделения. Поэтому для анализа лекарственных веществ всегда подбирают узкий диапазон концентраций буфера, при котором достигаются чёткие, хорошо разделённые пики и приемлемое время анализа.В технологических и аналитических методиках для фармацевтических субстанций и готовых лекарственных форм обычно оптимизируют тип буфера (например, борный, фосфатный, TRIS и др.) и именно его концентрацию, добиваясь устойчивого pH, приемлемого тока и максимального разрешения между близкими по структуре соединениями (изомерами, примесями, продуктами деградации). Это особенно важно при контроле качества, где нужно уверенно отделить примеси от основного действующего вещества и корректно оценить их содержание.

Параметр Что регулирует При увеличении параметра Риски при неправильном выборе
Тип буфера Диапазон pH, взаимодействие с аналитом, стабильность системы Меняется профиль зарядов молекул и электроосмотический поток Смещение pH, коагуляция, нестабильность сигналов, плохое разделение
Концентрация буфера Ионная сила, проводимость, форма и разрешение пиков Растёт ток, уменьшается влияние колебаний pH, возможен перегрев Размытые пики (слишком низкая) или перегрев и искажение пиков (слишком высокая)
pH буфера Степень ионизации лекарственных веществ, их заряд и подвижность Может измениться знак и величина заряда аналита Слияние пиков, изменение порядка элюирования, неверная количественная оценка
Напряжение Скорость миграции зон и время анализа Сокращается время анализа, возрастает ток Перегрев, деформации пиков, снижение эффективности разделения
Температура Вязкость буфера, подвижность и стабильность аналитов Снижается вязкость, увеличивается скорость миграции Нестабильность температурного профиля, дрейф времени удерживания
Диаметр капилляра Уровень нагрева и чувствительность детектирования При меньшем диаметре уменьшается перегрев, улучшается эффективность Слишком большой диаметр — перегрев; слишком малый — сложность в работе и засорение
Состав матрицы образца Взаимодействие с буфером, возможные матричные эффекты Повышается риск сопутствующих ионов, влияющих на форму пиков Искажение количественных результатов, появление дополнительных пиков