ХРОМАТОГРАФИЯ ОСНОВАНА НА СПОСОБНОСТИ ВЕЩЕСТВ
1) испускать свет
2) пропускать свет
3) адсорбироваться (+)
4) преломлять свет
В хроматографии разделение веществ происходит потому, что каждая молекула по-разному адсорбируется на неподвижной фазе (колонка, пластинка, сорбент в картридже). Одни компоненты сильнее прилипают к поверхности сорбента и задерживаются дольше, другие слабее удерживаются и быстрее уносятся подвижной фазой (элюентом, растворителем, газом). В результате они выходят или продвигаются на разное расстояние, что и дает разделение смеси на отдельные зоны/пики.
Свойства, связанные с излучением, пропусканием или преломлением света, используются уже на этапе детекции (например, УФ-детектор), но не лежат в основе самого процесса разделения. Ключевой механизм именно различная степень адсорбции компонентов на неподвижной фазе.
| Вид хроматографии | Неподвижная фаза | Подвижная фаза | Основной тип взаимодействий | Пример применения |
|---|---|---|---|---|
| Тонкослойная (ТСХ) | Силикагель или оксид алюминия на пластинке | Органический растворитель или смесь растворителей | Адсорбция на поверхности сорбента | Контроль чистоты субстанций, идентификация примесей |
| Колоночная адсорбционная | Силикагель в колонке | Растворитель, подаваемый через колонку | Различная сила адсорбции веществ | Препаративное выделение соединений из смеси |
| Высокоэффективная жидкостная (ВЭЖХ) | Мелкодисперсный сорбент (часто модифицированный C18) | Вода/буфер + органический растворитель под давлением | Гидрофобные, ионные и другие специфические взаимодействия | Количественный анализ ЛС, контроль стабильности |
| Газовая хроматография (ГХ) | Жидкость или полимер на инертном носителе, капилляр | Инертный газ (He, N₂ и др.) | Распределение между газовой фазой и адсорбированной фазой | Анализ летучих примесей, ароматизаторов, растворителей |
| Ионообменная | Ионообменная смола (катионит или анионит) | Водные буферы разной ионной силы и pH | Ионный обмен между сорбентом и растворенными ионами | Разделение аминокислот, белков, неорганических ионов |
| Гель-проникающая (эксклюзионная) | Пористый гель с порами заданного размера | Обычно водный или органический растворитель | Ситовое разделение по размеру молекул | Определение молекулярной массы полимеров, белков |