ЭЛЕКТРОФОРЕЗ ПОЗВОЛЯЕТ РАЗДЕЛЯТЬ И
1) определять количество компонентов смеси
2) определять структуру компонентов смеси
3) получать новые компоненты смеси
4) идентифицировать компоненты различных смесей (+)
При электрофорезе молекулы или ионы в растворе движутся в электрическом поле с разной скоростью в зависимости от заряда, размера и формы. В результате на носителе (гель, бумага, ацетат целлюлозы и др.) образуются отдельные полосы/зоны — каждая зона соответствует отдельному веществу. По положению и характеру этих зон можно сопоставлять образец с эталонными веществами и, таким образом, идентифицировать компоненты даже в разных смесях, если условия разделения одинаковы.
Сам по себе электрофорез не строит полную структурную формулу вещества, не синтезирует новые соединения и не даёт точного количественного результата без дополнительных методов (денситометрия, калибровочные кривые и т.п.). Его основная фармацевтическая ценность — качественный анализ: разделить и узнать, какие именно вещества присутствуют, сравнивая с стандартами, что полностью соответствует варианту про идентификацию компонентов различных смесей.
| Вид электрофореза | Тип носителя | Что разделяют | Основной признак разделения | Примеры применения в фармации |
|---|---|---|---|---|
| Бумажный | Фильтровальная бумага | Ионы, небольшие молекулы | Заряд и подвижность в водном буфере | Контроль примесей в водорастворимых ЛС, разделение неорганических ионов |
| Гель-электрофорез (ПААГ) | Полиакриламидный гель | Белки, пептиды | Размер и заряд белковых молекул | Идентификация белковых препаратов, контроль степени очистки биопрепаратов |
| Агарозный гель-электрофорез | Агарозный гель | Нуклеиновые кислоты | Длина фрагмента ДНК/РНК | Контроль качества генетических конструкций, оценка целостности нуклеиновых кислот |
| Капиллярный электрофорез | Тонкий капилляр, жидкий буфер | Малые органические молекулы, ионы | Электрофоретическая подвижность в электрическом поле | Анализ действующих веществ и примесей в лекарственных формах, фармакопейный контроль |
| Изоэлектрофокусирование | Гель с pH-градиентом | Белки | Изоэлектрическая точка (pI) | Точная идентификация белков, контроль микрогетерогенности биофармацевтических препаратов |
| Двухмерный электрофорез | Комбинация двух гелей/методов | Сложные смеси белков | Сочетание pI и молекулярной массы | Глубокий анализ белковых препаратов, исследовательский контроль качества |
