МЕТОДОМ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЛАВОНОИДОВ ЯВЛЯЕТСЯ
1) йодиметрия
2) перманганатометрия
3) гравиметрия
4) спектрофотометрия (+)
Для количественного анализа флавоноидов в фармсырье и препаратах на практике используют спектрофотометрические методики в УФ–видимой области. Они основаны на образовании окрашенных хелатных комплексов (например, с AlCl₃) или на собственном поглощении агликонов; измеряют оптическую плотность при характерных длинах волн (часто 410–430 нм для комплексов рутин-типа) и рассчитывают содержание по калибровочному графику, соблюдая закон Бугера–Ламберта–Бера. Это обеспечивает специфичность к флавоноидной системе и хорошую воспроизводимость при сравнении со стандартами (рутину/кверцетину).
Титриметрические окислительно-восстановительные подходы (йодиметрия, перманганатометрия) для флавоноидов мало пригодны из-за низкой селективности: окисляются и другие фенольные/восстановительные компоненты матрицы. Гравиметрия тоже не подходит для смесей флавоноидов в сырье, поскольку не обеспечивает ни селективной, ни достаточной чувствительности. Поэтому спектрофотометрия — корректный и общепринятый метод количественного определения.
| Метод | Принцип | Реагенты / λ | Применимость к флавоноидам | Преимущества | Ограничения |
|---|---|---|---|---|---|
| Спектрофотометрия (комплекс с AlCl₃) | Образование хелатного комплекса с усилением поглощения | AlCl₃; λ≈410–430 нм | Высокая селективность к флавонам/флавонолам | Чувствительно, воспроизводимо, стандартизируемо | Чувствительно к рН/комплексу; нужен стандарт |
| Спектрофотометрия (нативное УФ) | Измерение собственного УФ-поглощения агликонов | λ≈250–290, 330–370 нм | Подходит для чистых веществ/экстрактов после очистки | Просто, быстро | Меньше селективность в сложных матрицах |
| TLC-денситометрия | Разделение на пластине и количественная денситометрия зон | Алюминий-или натриевые реагенты; детекция при 254/366 нм | Хорошо для смеси флавоноидов | Дешево, позволяет одновременно идентифицировать | Ниже точность vs HPLC; ручные операции |
| HPLC-DAD (сравнение) | Хроматографическое разделение с диодной матрицей | Мобильная фаза (MeOH/ACN), DAD 200–400 нм | Золотой стандарт для сложных экстрактов | Высокая селективность/точность, профилирование | Дорого, требует оборудования и стандартов |
| Йодиметрия | Окисление I₂/I⁻ с титрованием | I₂, крахмал | Низкая селективность к флавоноидам | Просто, доступно | Мешают любые восстановители в матрице |
| Перманганатометрия | Окисление KMnO₄ в кислой/нейтральной среде | KMnO₄, кислота | Не рекомендована для смесей флавоноидов | Доступно | Сильная неселективность, переокисление |
| Гравиметрия | Взвешивание осадка/остатка после операций | Осадители (редко применимо) | Практически неприменима | Простая аппаратура | Низкая селективность и чувствительность |
