МЕТОДЫ АБСОРБЦИОННОЙ СПЕКТРОФОТОМЕТРИИ (СПЕКТРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА) ОСНОВАНЫ НА
1) зависимости величины показателя преломления света от концентрации раствора
2) измерении силы тока между погруженными в раствор электродами
3) избирательном поглощении электромагнитного излучения (+)
4) способности вещества вращать плоскость поляризованного света

Абсорбционная спектрофотометрия основана на том, что вещества по-разному (избирательно) поглощают электромагнитное излучение на определённых длинах волн. В практике аптеки и контроля качества это используют так: через раствор пропускают свет нужного диапазона (чаще УФ/видимый), и по уменьшению интенсивности прошедшего излучения судят о том, сколько вещества присутствует.

Количественная часть обычно опирается на закон Бугера–Ламберта–Бера: чем выше концентрация поглощающего компонента и чем больше толщина слоя, тем больше оптическая плотность (выше поглощение). Поэтому метод удобен для идентификации (по спектру/максимумам поглощения) и для точного определения содержания действующего вещества в растворах, если соблюдены условия (прозрачность матрицы, корректный выбор длины волны, отсутствие мешающих примесей).

Параметр/элемент	Что означает	Зачем важно в фармконтроле	Типичная ошибка
Избирательное поглощение	Разные вещества поглощают свет на разных длинах волн (есть свои максимумы)	Позволяет выбрать длину волны, где аналит поглощает сильнее всего, повышая чувствительность	Выбор длины волны, где сильно поглощают примеси/растворитель
Оптическая плотность (A)	Мера поглощения; растёт при увеличении концентрации	Используется для расчёта содержания вещества по калибровке или по удельному показателю	Считывание процента пропускания вместо A без пересчёта
Закон Бугера–Ламберта–Бера	A пропорциональна концентрации и толщине слоя	Даёт линейную зависимость для расчётов и построения градуировочного графика	Работа вне линейного диапазона (слишком концентрированный раствор)
Кювета (толщина слоя, l)	Длина оптического пути (часто 1 см); материал — стекло/кварц	Кварц нужен для УФ; одинаковые кюветы снижают погрешность	Использование стеклянной кюветы в УФ-диапазоне; грязные/поцарапанные стенки
Холостой раствор (blank)	Растворитель/матрица без аналита для установки нуля	Компенсирует собственное поглощение растворителя и фон реагентов	Неправильный blank (другой растворитель, pH или реагенты)
Мешающие факторы	Мутность, пузырьки, рассеяние, посторонние хромофоры	Могут завышать A и давать ложные результаты содержания	Измерение непрозрачного/нефильтрованного раствора, наличие пузырьков
Калибровка	Серия стандартов для построения зависимости A–C	Обеспечивает точность при анализе лекарственных форм и субстанций	Редкая калибровка, использование просроченных стандартов