ОТЛИЧИЕ УФ-СПЕКТРОФОТОМЕТРИИ ОТ ФОТОКОЛОРИМЕТРИИ ЗАКЛЮЧАЕТСЯ В
1) способах расчета концентрации вещества
2) зависимости светопоглощения от концентрации вещества в растворе
3) зависимости светопоглощения от толщины поглощающего слоя
4) используемой области оптического спектра (+)

В обоих методах поглощение света подчиняется закону Бугера–Ламберта–Бера: измеряется оптическая плотность и по калибровке рассчитывают концентрацию; влияние толщины кюветы и линейная зависимость от концентрации здесь одинаковы. Ключевое различие — в участке спектра и, как следствие, в природе определяемых веществ: УФ-спектрофотометрия регистрирует поглощение в УФ-области (чаще 190–400 нм) электронными переходами хромофоров молекул, тогда как фотоколориметрия работает в видимом диапазоне (≈400–700 нм) и обычно опирается на образование окрашенных комплексов или собственную окраску вещества.

Для провизора это важно при выборе методики: если аналит имеет выраженные УФ-полосы (пуриновые/пиримидиновые основания, ароматические кольца, карбонильные группы), удобнее использовать УФ-спектрофотометр. Если же требуется перенести бесцветное вещество в область видимого — готовят окрашенный дериват и применяют фотоколориметрию. Следовательно, отличие заключается в используемой области оптического спектра. Правильный вариант: 4) используемой области оптического спектра (+).

Критерий	УФ-спектрофотометрия	Фотоколориметрия (видимая область)
Спектральный диапазон	190–400 нм (иногда до 1100 нм с УФ-Vis приборами)	≈400–700 нм
Источник света	Дейтериевая лампа (УФ), галогенная для Vis в комбинированных приборах	Вольфрам-галоген, светодиоды выбранной длины волны или светофильтры
Отбор длины волны	Монохроматор (решётка/призма), высокая селективность	Светофильтры или фиксированные длины волн
Необходимость дериватизации	Часто не требуется при наличии УФ-хромофора	Часто требуется образование окрашенного комплекса/деривата
Закон Бугера–Ламберта–Бера	Выполняется в рабочем диапазоне концентраций	Также выполняется при правильной калибровке
Типичные матричные помехи	Растворители, примеси поглощающие в УФ, мутность	Фоновая окраска, перекрытие полос, мутность
Чувствительность	Высокая для УФ-активных молекул	Зависит от интенсивности окраски комплекса
Примеры применений	Азотсодержащие гетероциклы, ароматические ЛВ, нуклеотиды	Железо с о-фенантролином, фосфаты (молибденовый синий), фенолы
Кюветы	Кварцевые (прозрачны в УФ)	Стеклянные/пластиковые (для видимого)
Преимущества	Селективность по λ, часто без реактивов, быстрый анализ	Доступность оборудования, простые протоколы, высокая визуальная наглядность
Ограничения	Требуются УФ-прозрачные растворители и кюветы; чувствительность к матрице	Нужны реактивы/стабильная окраска; возможны побочные реакции