Под электрофорезом понимают метод анализа, основанный на способности заряженных частиц к перемещению в

ПОД ЭЛЕКТРОФОРЕЗОМ ПОНИМАЮТ МЕТОД АНАЛИЗА, ОСНОВАННЫЙ НА СПОСОБНОСТИ ЗАРЯЖЕННЫХ ЧАСТИЦ К ПЕРЕМЕЩЕНИЮ В
1) электрическом поле (+)
2) коллоидном растворе
3) магнитном поле
4) растворе

Правильный ответ: перемещение заряжённых частиц происходит в электрическом поле. Электрофорез используют для разделения и анализа белков, пептидов, нуклеиновых кислот и лекарственных веществ-электролитов по знаку и величине заряда, а также по размеру. Скорость миграции пропорциональна напряжённости поля и электрофоретической подвижности, которая зависит от заряда частицы, её гидродинамического радиуса и вязкости среды; важна и ζ-потенциал поверхностей (особенно в капиллярном формате).

Коллоидный раствор или просто раствор без приложения поля не обеспечивает направленного движения, а магнитное поле влияет лишь на магниточувствительные частицы (что не есть классический электрофорез). В фармпрактике критичны выбор буфера (pH ↔ степень ионизации аналита), ионная сила (экранование заряда), матрица (агароза/ПААГ/капилляр), контроль нагрева и визуализация (кумасси, серебрение, флуоресценция). Это позволяет контролировать чистоту субстанций, подтверждать подлинность биополимеров и оценивать стабильность препаратов.

Параметр Что означает Типичные варианты Влияние на миграцию/результат Примечание для фармацевта
Поле (E, В/см) Напряжённость электрического поля 5–20 В/см (гелевые), до кВ/м (капилляр) ↑E → ↑скорости, но ↑нагрев и риск подплывания зон Следить за стабилизацией тока/мощности
Заряд и размер частицы Эффективный заряд и гидродиаметр Белки, пептиды, ДНК/РНК, ионные ЛВ ↑|q| → быстрее; ↑размер → медленнее Для белков применяют денатурацию SDS для выравнивания q/m
Буфер (pH) Среда, задающая степень ионизации ТАЕ/ТБЕ (ДНК), Tris-Gly (SDS-PAGE) Смещение pH меняет заряд аналита и направление миграции Контролировать свежесть/ёмкость буфера
Ионная сила Концентрация ионов в буфере 0.05–0.1 М (гелевые) ↑Ионная сила → ↓напряжение на геле, ↑нагрев Не завышать — ухудшится разрешение
Матрица Физическая среда разделения Агароза, ПААГ, бумага, капилляр Определяет ситацию и диапазон масс Выбор под размер молекул и цель анализа
Температура Нагрев из-за джоулева тепла Охлаждение, термостаты Перегрев → диффузия, искажение полос Держать стабильной для воспроизводимости
Электроосмос Поток растворителя к катоду Заметен в капиллярах кремнезёма Сдвигает все зоны, влияет на время миграции Регулируется pH/покрытиями стенок
Визуализация Методы обнаружения зон Кумасси, серебрение, EtBr, SYBR, УФ-детекторы Чувствительность/специфичность различаются Учитывать безопасность (EtBr — мутаген)
Калибровка Маркерные стандарты Ладдеры ДНК, стандарты масс белков Позволяет оценить размер/мол. массу Обязательно для количественных выводов
Применения Задачи анализа в фарме Идентификация, чистота, стабильность, контроль примесей Высокое разрешение и специфичность разделения Часть регламентных методов контроля качества