ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦА ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО УФ-СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРЕДПОЛАГАЕТ
1) растирание лекарственного вещества с калия бромидом и последующее прессование
2) растирание лекарственного вещества с вазелиновым маслом или другой жидкостью и помещение полученной суспензии между двумя пластинками из калия бромида
3) взятие навески лекарственного вещества с последующим ее растворением и разбавлением соответствующим растворителем с использованием мерных колб (+)
4) растирание лекарственного вещества с калия бромидом
Для количественного УФ-спектрофотометрического анализа необходимо получить **прозрачный истинный раствор** вещества с точно известной концентрацией. Поэтому навеску вещества растворяют в подходящем растворителе (вода, спирты, буферы и др.), затем доводят объем до метки в **мерной колбе** и, при необходимости, дополнительно разбавляют. Только в таком случае выполняется закон Бугера–Ламберта–Бера, а полученная оптическая плотность прямо пропорциональна концентрации, что и позволяет проводить количественные расчёты. Именно поэтому верным является вариант с растворением и разбавлением в мерной колбе.
Приемы с растиранием вещества с бромидом калия или вазелиновым маслом используются преимущественно в **ИК-спектроскопии**, где измеряют спектры твердых образцов в виде таблеток KBr или суспензий в инертной среде. Такие системы не обеспечивают строгого контроля концентрации в растворе, пути оптического луча и однородности, поэтому не подходят для точного количественного УФ-анализа. В УФ-спектрофотометрии принципиально важно работать с растворами в стандартных кюветах, где заданы толщина слоя и концентрация.
| Параметр | Количественный УФ-анализ (раствор в мерной колбе) | ИК-таблетка с KBr / растирание | ИК-спектры в вазелиновом масле (суспензия) |
|---|---|---|---|
| Физическое состояние образца | Истинный раствор | Твёрдая таблетка (прессованный порошок) | Суспензия твёрдого вещества в масле |
| Способ подготовки | Точное взвешивание, растворение, доведение до метки в мерной колбе, при необходимости — разведение | Растирание вещества с KBr, прессование в таблетку | Растирание вещества с вазелиновым маслом или иной инертной жидкостью, нанесение слоя между пластинами |
| Контроль концентрации | Высокая точность (использование мерной посуды, расчет по навеске) | Необходимые массовые доли трудно воспроизводимы, концентрация условна | Концентрация частиц в суспензии условна и плохо воспроизводима |
| Основная область применения | Количественное определение (ассай, содержание действующего вещества, калибровочные графики) | Качественный ИК-анализ, идентификация функциональных групп | Качественный ИК-анализ, сравнение спектров веществ |
| Соответствие закону Бугера–Ламберта–Бера | Да, при правильной подготовке и выборе диапазона концентраций | Не применяется; измеряется поглощение твёрдой фазы | Не применяется; система является неоднородной |
| Тип кюветы/держателя | Кварцевые (или стеклянные — в видимой области) кюветы стандартной толщины (обычно 1 см) | Пресс-форма для таблеток, держатель для KBr-пластинки | Пластины (обычно из KBr или другого ИК-прозрачного материала) |
| Точность количественного анализа | Высокая при соблюдении методики | Низкая, метод в основном качественный | Низкая, метод в основном качественный |
