ПРИ КОЛИЧЕСТВЕННОМ ОПРЕДЕЛЕНИИ АЗАТИОПРИНА В ТАБЛЕТКАХ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ РАСЧЕТ СОДЕРЖАНИЯ ПРОВОДЯТ ПО
1) отношению времени удерживания основных пиков у испытуемого и стандартного растворов
2) значению удельного показателя светопоглощения
3) величине удельного вращения вещества
4) отношению площадей основных пиков у испытуемого и стандартного растворов (+)
При количественном определении азатиоприна методом ВЭЖХ расчет делают по отношению площадей основных пиков испытуемого и стандартного растворов, потому что именно площадь пика пропорциональна количеству вещества, прошедшего через детектор. Это основной принцип количественной хроматографии: чем больше вещества в пробе, тем больше интегральный сигнал, то есть площадь пика.
Методы лабораторного контроля качества лекарственных средств, санитарно-гигиенические исследования и оценка безопасности продукции требуют хорошего знания аналитической химии и инструментальных методов анализа. Именно поэтому при подготовке специалистов востребованы тесты с ответами по медико-профилактическому делу, где рассматриваются вопросы хроматографии, токсикологии, гигиены и современных способов лабораторной диагностики.
Время удерживания используют прежде всего для идентификации вещества, чтобы подтвердить, что пик действительно соответствует азатиоприну. Удельное светопоглощение и удельное вращение относятся к другим аналитическим подходам и для стандартного количественного расчета в ВЭЖХ таблеток здесь не являются основой. Поэтому правильный выбор — расчет по отношению площадей основных пиков испытуемого и стандартного растворов.
| Показатель | Что показывает | Использование в анализе азатиоприна методом ВЭЖХ | Подходит для количественного расчета |
|---|---|---|---|
| Площадь пика | Пропорциональна количеству вещества | Основной параметр для сравнения испытуемого и стандартного растворов | Да |
| Время удерживания | Характеризует положение пика на хроматограмме | Применяют для подтверждения подлинности вещества | Нет |
| Высота пика | Зависит от количества вещества, но менее надежна, чем площадь | Может учитываться вспомогательно, но не является стандартной основой расчета | Ограниченно |
| Удельный показатель светопоглощения | Характеризует поглощение света веществом | Используется в спектрофотометрии, а не как основной расчетный критерий в данном случае | Нет |
| Удельное вращение | Отражает оптическую активность вещества | Применяется в поляриметрии для некоторых веществ | Нет |
| Стандартный раствор | Содержит известное количество азатиоприна | Служит эталоном для сопоставления площади пика | Да |
| Испытуемый раствор | Раствор, приготовленный из таблеток | По его площади пика рассчитывают содержание действующего вещества | Да |
Итог: в количественной ВЭЖХ для таблеток азатиоприна ориентируются именно на отношение площадей основных пиков, так как это прямой и фармакопейно обоснованный способ расчета содержания действующего вещества.