ПРИ КОЛИЧЕСТВЕННОМ ОПРЕДЕЛЕНИИ НИКОТИНОВОЙ КИСЛОТЫ В РАСТВОРЕ ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ МЕТОДОМ СПЕКТРОФОТОМЕТРИИ В УФ-ОБЛАСТИ РАСЧЕТ СОДЕРЖАНИЯ ПРОВОДЯТ ПО
1) фактору показателя преломления раствора испытуемого вещества
2) величине удельного вращения вещества
3) отношению площадей основных пиков у испытуемого и стандартного растворов
4) отношению оптических плотностей испытуемого и стандартного растворов (+)
При УФ-спектрофотометрическом определении никотиновой кислоты количественный расчёт основан на законе Бугера–Ламберта–Бера: оптическая плотность прямо пропорциональна концентрации при постоянной длине волны и толщине кюветы. Поэтому используют стандартный раствор с точно известной концентрацией и измеряют оптические плотности (D) обоих растворов при одинаковых условиях. Отношение оптических плотностей испытуемого и стандартного растворов (Dисп/Dст) прямо отражает отношение их концентраций, что позволяет корректно вычислить содержание вещества в препарате. Показатель преломления, удельное вращение и площади пиков характерны для других методов анализа (рефрактометрия, поляриметрия, хроматография) и в данном случае не применяются.
| Показатель | Суть | Роль в УФ-спектрофотометрии никотиновой кислоты | Комментарий для фармацевта |
| Оптическая плотность (D) | Логарифм отношения падающего и прошедшего света | Основной измеряемый параметр; пропорционален концентрации | Чем выше D (в пределах линейности), тем выше содержание вещества |
| Стандартный раствор | Раствор с точно известной концентрацией | Служит эталоном для расчёта содержания в испытуемом | Готовится строго по ГФ: точное взвешивание, проверенный растворитель |
| Отношение Dисп/Dст | Сравнение сигналов испытуемого и стандарта | По этому отношению рассчитывают концентрацию никотиновой кислоты | Исключает погрешности, связанные с толщиной кюветы и др. постоянными |
| Длина волны (λ) | Положение максимума поглощения (λmax) | Измерения проводят на характеристической λ никотиновой кислоты | Неправильно выбранная λ даёт значительную систематическую ошибку |
| Показатель преломления, удельное вращение | Физико-химические константы | Для данного метода количественного определения не используются | Применимы в рефрактометрии и поляриметрии, но не в данном анализе |
| Площади пиков | Параметр хроматографического анализа | Относятся к ВЭЖХ/ГЖХ, а не к УФ-спектрофотометрии раствора | Не путать: здесь измеряют D, а не площади хроматографических пиков |