С ПОМОЩЬЮ ПРЕДСТАВЛЕННОЙ ФОРМУЛЫ
1) количество вещества, сорбируемого неподвижной фазой
2) число теоретических тарелок (+)
3) время удерживания несорбируемого вещества
4) время удерживания
Правильный ответ — число теоретических тарелок . В фармацевтическом анализе хроматографическая эффективность оценивается через N: чем уже пик при заданном времени удерживания, тем больше N и тем лучше разделение примесей от действующего вещества. На практике N рассчитывают по времени удерживания аналитика и ширине пика: либо по ширине на уровне основания (N = 16·(tR/wb)²), либо по ширине на полувысоте (N = 5.54·(tR/w1/2)²). Эти выражения прямо связывают кинетику масс-переноса и диффузию с качеством пиков, поэтому именно они применяются для оценки числа теоретических тарелок колонки.
Другие варианты к таким формулам не относятся: количество сорбированного вещества определяется из изотерм и масс-баланса, а времена удерживания (включая время мёртвого объёма t0) берут непосредственно с хроматограммы, а не вычисляют через квадратичное отношение tR/ширина пика . Потому при валидации методик контроля качества ЛС параметр N — основной индикатор эффективности и воспроизводимости колонки.
| Параметр | Обозначение | Формула / расчёт | Смысл | Примечание |
|---|---|---|---|---|
| Число теоретических тарелок | N | N = 16·(tR/wb)² или N = 5.54·(tR/w1/2)² | Эффективность колонки (резкость пика) | Выбор формулы зависит от способа измерения ширины пика |
| Высота эквивалентной тарелки | H | H = L / N | Эффективность в пересчёте на длину | Меньше H → лучше эффективность |
| Коэффициент удерживания | k′ | k′ = (tR − t0) / t0 | Степень задержки аналита в колонке | Оптимально 1–10 для ВЭЖХ |
| Разрешение двух пиков | Rs | Rs = 2·(tR2 − tR1)/(wb1 + wb2) | Степень разделения компонентов | Цель: Rs ≥ 1.5 |
| Коэффициент селективности | α | α = k′2/k′1 (k′2 > k′1) | Различие в удерживании двух веществ | Чем больше α, тем легче разделить |
| Ширина пика на полувысоте | w1/2 | Измеряют на уровне 50% высоты пика | Вариант оценки остроты пика | Связь: wb ≈ 1.699·w1/2 |
| Ширина пика по основанию | wb | Измеряют на уровне основания | Используется в формуле для N | Чувствительна к хвостам |
| Время мёртвого объёма | t0 | По не удерживаемому маркеру | Точка отсчёта для k′ | Определяют с незадерживаемым веществом |
| Фактор асимметрии | As | As = b/a (на 10% высоты) | Хвостатость/фронтирование пика | Идеал ~1.0–1.2 |
| Линейная скорость элюента | u | u = L / t0 | Влияет на N через уравнение Ван-Деэмтера | Ищут область минимума H(u) |
Поддерживайте колонку и подвижную фазу в одинаковых условиях — стабильные N и Rs облегчат выпускной контроль качества лекарств.