СУЩНОСТЬ ФОТОМЕТРИИ ЗАКЛЮЧАЕТСЯ В ИЗМЕРЕНИИ
1) степени поглощения света анализируемым веществом (+)
2) разности электродвижущей силы электродной пары в зависимости от концентрации ионов анализируемого вещества
3) преломления света анализируемым веществом
4) угла отклонения плоскости поляризации поляризованного света анализируемым веществом
Верный выбор — 1), потому что в абсорбционной фотометрии оценивают, насколько интенсивность проходящего через раствор света уменьшается за счёт поглощения молекулами аналита. Показатель измерения — оптическая плотность (A), связанная с концентрацией линейной зависимостью по закону Бугера–Ламберта–Бера: A = ε·b·c (где ε — молярный коэффициент поглощения, b — оптическая длина кюветы, c — концентрация). За счёт калибровки по стандартам метод даёт точные и воспроизводимые результаты для большого числа лекарственных веществ и биомаркеров.Варианты 2), 3) и 4) относятся к другим физико-химическим методам анализа: потенциометрии (ЭДС электродной пары), рефрактометрии (изменение показателя преломления) и поляриметрии (вращение плоскости поляризации). Они полезны в своих задачах, но не описывают сущность фотометрии, где ключевым является именно измерение степени поглощения света.
| Метод | Что измеряют | Физический принцип | Типичные длины волн | Кюветы/датчики | Примеры применений в фармпрактике | Ограничения |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Фотометрия (абсорбционная) | Оптическая плотность (A) = степень поглощения | Закон Бугера–Ламберта–Бера: A ∝ c | УФ/ВИД: ~190–800 нм | Кварцевые/стеклянные кюветы 1 см | Количественный контроль АФИ, определение нитратов, салицилатов, железа | Не работает для бесцветных соединений без хромофора; мешают мутность и флуоресценция |
| Нефелометрия/турбидиметрия | Рассеяние/ослабление света взвесью | Рассеяние частицами (эффект Тиндаля) | ВИД: ~400–700 нм | Кюветы для мутных образцов, датчик под углом | Белковые иммунные тесты, контроль мутности инфузий | Чувствительна к размеру частиц и пузырькам |
| Флуориметрия | Интенсивность испускаемого света | Возбуждение → излучение с большей длиной волны | Возбуждение/эмиссия зависят от аналита | Спец. кюветы, 90° геометрия | Трасс-определения витаминов, антибиотиков | Гашение флуоресценции, фотодеградация |
| Поляриметрия | Угол вращения поляризации | Оптическая активность хиральных молекул | Линии Na D (589 нм) и др. | Трубка поляриметра | Контроль сахарозы, энантиомерной чистоты | Требует оптически активных веществ |
| Рефрактометрия | Показатель преломления (n) | Изменение скорости света в среде | Белый свет/монохромат | Призматический датчик | Определение концентрации растворов, контроль сиропов | Чувствительна к температуре и примесям |
| Потенциометрия | ЭДС электродной системы | Нернстовская зависимость E = f(активности ионов) | — | Ионселективные электроды | рН-метрия, титрования, определение ионов (Na⁺, Cl⁻) | Требует калибровки, чувствительна к матрице |
