В ФОТОКОЛОРИМЕТРИЧЕСКОМ МЕТОДЕ АНАЛИЗА ИЗМЕРЯЮТ ВЕЛИЧИНУ
1) интенсивности флуоресценции
2) угла вращения плоскости поляризации
3) показателя преломления
4) оптической плотности (+)
Верный вариант: 4) оптической плотности (+). В фотоколориметрии регистрируют, насколько раствор ослабляет проходящий свет, и переводят это ослабление в оптическую плотность (D = lg I0/I). По закону Бугера–Ламберта–Бера D прямо пропорциональна концентрации и длине оптического пути, поэтому именно измерение оптической плотности обеспечивает количественную оценку содержания вещества после образования окрашенного комплекса или прямого поглощения в видимой области.
Для фармацевта это означает: корректная калибровка (холостой образец, линейный участок кривой, контроль pH/комплексообразователя) — ключ к точности. В отличие от флуориметрии, поляриметрии или рефрактометрии, фотоколориметр не измеряет свечение, угол вращения или показатель преломления; он оценивает именно степень поглощения света анализируемым раствором.
| Метод | Что измеряют | Ключевая физ. величина / закон | Область спектра / источник | Типичный диапазон концентраций | Применения в фармацевтическом анализе | Помехи и ограничения | Единицы результата |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Фотоколориметрия | Ослабление прошедшего света | D = lg(I0/I); закон Бугера–Ламберта–Бера | Видимая область; светофильтры | ~0.5–50 мг/л (зависит от хромофора) | Количественное определение окрашенных комплексов (Fe(III)-тиоцианат, витамины после дериватизации) | Мутность/взвеси, побочное поглощение, несоблюдение pH | D (безразмерно), концентрация (мг/л) |
| Спектрофотометрия (UV-Vis) | Оптическая плотность по длине волны | Тот же закон Б–Л–Б; спектры поглощения | УФ/видимая; монохроматор | мкг/л – десятки мг/л | Идентификация/количественный анализ АФС по λmax | Перекрытие полос, растворители, дрейф базовой линии | D, ε, c (моль/л) |
| Турбидиметрия | Ослабление из-за рассеяния | Коэффициент мутности | Видимая; прямая геометрия | мг/л – г/л (суспензии) | Белковые/латексные иммунные тесты, контроль мутности | Агрегация, нестабильность дисперсий | NTU, концентрация |
| Нефелометрия | Интенсивность рассеянного света (под углом) | Рассеяние Тиндаля | Видимая; детектор под 90° | Низкие мг/л – мкг/л | Иммунонефелометрические определения белков | Флуоресценция, фоновые частицы | Отн. ед., концентрация |
| Флуориметрия | Интенсивность флуоресценции | Квантовый выход, законы Стокса | УФ-возбуждение; детекция видимой/УФ эмиссии | нг/л – мкг/л (высокая чувствительность) | Трасс-анализ витаминов, полiarом. соединений | Гашение, самоэкранование, фотообесцвечивание | Отн. ед., концентрация |
| Поляриметрия | Угол вращения плоскости поляризации | Специфическое вращение [α] | Видимая (обычно Na D-линия) | г/100 мл и выше | Определение сахаров, хиральных АФС | Цвет/мутность мешают, температура критична | Градусы, % (по калибровке) |
| Рефрактометрия | Показатель преломления | Закон Снеллиуса; n | Белый свет/LED; призменные системы | Высокие концентрации растворов | Идентификация растворителей, контроль содержания | Температура, примеси летучих компонентов | n (безразмерно), % Brix и др. |
Итого: фотоколориметрия — это количественное измерение оптической плотности с последующим переводом в концентрацию по калибровочному графику; остальные перечисленные величины относятся к иным методам и здесь не измеряются.