В ИСХОДНЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ НАБЛЮДЕНИЯ ЗА ПРОЦЕССОМ ЭЛЕКТРОФОРЕЗА В ТОЛЩЕ ПОЛИАКРИЛАМИДНОГО ГЕЛЯ
1) добавляют нейтральный (не заряженный) краситель
2) ничего не добавляют
3) добавляют краситель, несущий заряд противоположного знака по сравнению с анализируемыми белками
4) добавляют краситель, несущий заряд того же знака, что и анализируемые белки (+)
Верный вариант связан с тем, что для контроля продвижения фронта при электрофорезе в полиакриламидном геле используют специальный индикаторный краситель, который должен двигаться в электрическом поле в том же направлении, что и исследуемые белки. Поэтому краситель подбирают с зарядом того же знака, что и у разделяемых молекул. Тогда он мигрирует впереди основной зоны и показывает, насколько далеко продвинулся процесс.
Если взять нейтральный краситель, он практически не будет перемещаться под действием поля и не даст информации о ходе разделения. Краситель с противоположным зарядом станет двигаться к другому электроду, что сделает наблюдение бесполезным. На практике такой подход нужен для своевременной остановки электрофореза, чтобы белковые фракции не вышли из геля и разделение осталось качественным.
Часто в лабораторной практике применяют бромфеноловый синий или сходные трекинговые красители. Они хорошо заметны визуально, быстро перемещаются и помогают контролировать время анализа без влияния на основные белковые полосы.
| Вариант добавки | Поведение в электрическом поле | Подходит для контроля | Причина |
|---|---|---|---|
| Нейтральный краситель | Почти не мигрирует | Нет | Нет направленного движения |
| Краситель противоположного заряда | Идет в обратную сторону | Нет | Движется к другому электроду |
| Краситель того же знака заряда | Движется вместе с фронтом | Да | Позволяет наблюдать ход электрофореза |
| Ничего не добавлять | Фронт не виден | Нет | Нет визуального ориентира |
| Типичный пример | Бромфеноловый синий | Да | Хорошо заметен и удобен |
