В КАЧЕСТВЕ ЭЛЕКТРОЛИТА ДЛЯ РАЗДЕЛЕНИЯ ФЕНОТЕРОЛА И САЛЬБУТАМОЛА МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОГО ЗОННОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА ИСПОЛЬЗУЮТ
1) боратный буфер
2) трис-буфер (+)
3) фосфат-боратный буфер
4) натрий-боратный буфер
Правильный выбор — трис-буфер. Для β2-агонистов с основными аминогруппами (как фенотерол и сальбутамол) рабочий диапазон pH трис-системы (около 7,5–9) обеспечивает устойчивый заряд и различающиеся электрофоретические подвижности. Трис–HCl даёт низкий фон в УФ-области, умеренную силу ионной среды и стабильную электмоосмотическую течь, что улучшает разрешение и симметрию пиков в капиллярном зонном электрофорезе.
Боратные электролиты способны образовывать комплексы с фенольными/диольными фрагментами, что иногда приводит к хвостированию или непредсказуемым сдвигам подвижности. Фосфат-боратные и натрий-боратные системы также повышают риск комплексообразования и часто дают больший фон при 200–220 нм. Поэтому для рутинного разделения пары фенотерол/сальбутамол предпочтителен именно трис-буфер.
- боратный буфер
- трис-буфер (+)
- фосфат-боратный буфер
- натрий-боратный буфер
| Электролит (буфер) | Типичный pH | УФ-фон (200–220 нм) | Комплексы с диолами/фенолами | Влияние на EOF | Обычная конц., мМ | Плюсы для ФЕН/САЛ | Минусы/риски |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Трис–HCl | 7.5–9.0 | Низкий | Нет | Умеренный/стабильный | 10–50 | Хорошая форма пиков, воспроизводимость, мягкие условия | Ограниченный буферный диапазон выше pH 9 |
| Фосфатный (Na/K) | 2.5–7.5 | Средний | Нет | Может снижать EOF при низком pH | 10–50 | Жёсткий контроль pH, дешёвый | Больший УФ-фон, возможная адсорбция оснований на стенке |
| Боратный (Na-борат) | 8.0–10.0 | Низкий–средний | Да (с диолами/катехолами) | Умеренный/высокий | 10–50 | Полезен для целенаправленного комплексирования | Риск хвостирования/сдвигов подвижности у ФЕН/САЛ |
| Трис–борат (TBE-подобные) | 8.0–9.0 | Низкий | Возможны | Умеренный | 10–50 | Стабильный pH | Комплексообразование с фенольными группами осложняет метод |
| Ацетатный (аммоний/Na) | 3.5–5.5 | Очень низкий | Нет | Сниженная EOF | 10–50 | Подходит для катионов при кислых pH | Может ухудшить разделение близких оснований |
| Форматный (аммоний) | 2.5–4.5 | Очень низкий | Нет | Низкая EOF | 10–25 | Высокая чувствительность в УФ | Требует устойчивости к коррозии/растворимости |
| MES/MOPS (Good’s) | 6.0–7.5 | Низкий–средний | Нет | Стабильная | 10–50 | Биосовместимы, стабильны | Доступность/цена; иногда больший УФ-фон |