В КАЧЕСТВЕ НЕПОДВИЖНОЙ ФАЗЫ В ИОНООБМЕННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ИСПОЛЬЗУЮТ
1) сорбент, закрепленный на хроматографической пластинке
2) иониты, закрепленные на полимерной матрице (+)
3) полярный растворитель
4) газ-носитель
Правильный вариант — иониты, закреплённые на полимерной матрице. Это нерастворимые смолы (например, стирол-дивинилбензольные или акрилатные), на поверхности которых химически привиты заряженные функциональные группы (-SO₃⁻, -COO⁻, -N⁺(CH₃)₃ и др.). Аналит удерживается за счёт обратимого ионного обмена, а элюируют его изменением ионной силы или pH буфера. В фармпрактике так разделяют и количественно определяют аминокислоты, пептиды, сахара, катионные/анионные формы ЛВ, а также контролируют противоионы (Cl⁻, SO₄²⁻, Na⁺, K⁺) в готовых лекарственных формах.
Остальные варианты относятся к другим техникам: пластинка — это планарная (ТСХ), растворитель — подвижная, а не неподвижная фаза; газ-носитель применяют в газовой хроматографии. Поэтому именно привитые к полимерной матрице иониты образуют неподвижную фазу ионообменной хроматографии, обеспечивая селективное удерживание по заряду и степени ионизации молекул.
| Тип неподвижной фазы (ионит) | Функциональные группы | Заряд носителя | Полимерная матрица | Рабочий pH | Типичный элюент/режим | Примеры фарм-применений |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Катионообменник сильнокислотный (SCX/SAC) | -SO₃H / -SO₃⁻ | Отрицательный | Стирол-ДВБ | ~1–14 | Градиент соли (NaCl, NaNO₃) или снижение pH | Катионные ЛВ, неорганические катионы (Na⁺, K⁺, Ca²⁺) |
| Катионообменник слабокислотный (WAC) | -COOH / -COO⁻ | Отрицательный (при pH>pKa) | Акрилат/метакрилат | ~4–8 | Ацетатные/формиатные буферы | Мягкое разделение слабых оснований |
| Анионообменник сильноосновный (SAX) | -N⁺(CH₃)₃ | Положительный | Стирол-ДВБ или силика с прививкой | ~2–12 | Градиент соли (Cl⁻, NO₃⁻, ClO₄⁻) | Неорганические анионы, кислые ЛВ, противоположные ионы к солям ЛВ |
| Анионообменник слабоосновный (WAX) | -NR₂ / -NRH⁺ | Положительный (при низком pH) | Акрилат/целлюлоза/декстран | ~5–9 | Смена pH или ионной силы | Органические кислоты, нуклеотиды |
| DEAE-целлюлоза (WAX на полисахариде) | -O-CH₂-CH₂-N⁺H(CH₃)₂ | Положительный | Целлюлоза | ~6–9 | Буферы триэтаноламина/трис | Белки/пептиды, очистка биофармпрепаратов |
| CM-целлюлоза (WCX на полисахариде) | -CH₂-COO⁻ | Отрицательный | Целлюлоза | ~4–7 | Ацетатные буферы/градиент соли | Белки/ферменты в QC и R&D |
| Силика-SAX (привитая фаза для ВЭЖХ) | Алкил-аммоний четвертичный | Положительный | Силикагель | ~2–8 (ограничение по выщелачиванию) | Буферы фосфат/ацетат, градиент соли | Анионы в инъекционных растворах |
| Силика-SCX (привитая сульфоновая фаза) | -SO₃⁻ (на силике) | Отрицательный | Силикагель | ~2–8 | Формиат/фторацетат, pH-градиент | Катионные API, примеси-амины |
| Декстран/сефароза с прививкой (IEX-гели) | DEAE, Q, CM, S | +/- в зависимости от группы | Декстран/агароза | Широкий (биосовместимые) | Градиент соли/пошаговая элюция | Биофарма: антитела, вакцины, ферменты |
| Монодисперсные полимерные смолы | -SO₃⁻, -COO⁻, -NR₃⁺ | +/- | Стирол-ДВБ с узким размером частиц | Зависит от группы | Точный градиент ионной силы | Препаративная очистка солей ЛВ и контр-ионов |