В МИЦЕЛЛЯРНОЙ ЭЛЕКТРОКИНЕТИЧЕСКОЙ ХРОМАТОГРАФИИ РАЗДЕЛЕНИЕ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ В
1) колонках, заполненных твердым носителем
2) растворе электролита, содержащего метанол
3) тонком слое сорбента
4) растворе электролита, содержащего ПАВ (+)
В мицеллярной электрокинетической хроматографии (MEKC) разделение происходит в капилляре, но ключевой разделяющей средой является именно раствор электролита с ПАВ: при концентрации выше ККМ (критической концентрации мицеллообразования) ПАВ образует мицеллы, которые работают как псевдостационарная фаза. Аналиты по-разному распределяются между водной фазой и мицеллами (как при экстракции/распределении), поэтому вещества с большей любовью к мицеллам задерживаются дольше, а более гидрофильные — мигрируют быстрее. Метанол сам по себе может использоваться как органический модификатор, но без ПАВ не создаётся мицеллярная псевдофаза, характерная именно для MEKC.
| Компонент / параметр | Роль в MEKC | Как влияет на разделение | Практические замечания фармацевта |
|---|---|---|---|
| ПАВ (например, SDS) | Образует мицеллы — псевдостационарную фазу | Чем выше сродство аналита к мицеллам, тем больше задержка (дольше время миграции) | Следят за концентрацией выше ККМ; слишком много ПАВ может ухудшать форму пика и повышать ток |
| Фоновый электролит (буфер) | Задаёт pH и ионную силу | Влияет на заряд аналита и на электросм. поток → меняется порядок и скорость миграции | Для лекарственных веществ pH выбирают так, чтобы различить степени ионизации (кислоты/основания) |
| Органический модификатор (метанол, ацетонитрил) | Тонко настраивает растворимость и взаимодействия | Может менять размер/полярность мицелл и распределение аналитов между фазами | Добавляют умеренно: избыток может разрушать мицеллы или снижать селективность |
| Электросм. поток (EOF) | Транспортёр объёма раствора по капилляру | Сдвигает времена миграции всех компонентов; балансируется с подвижностью мицелл | Стабильный EOF = воспроизводимость; поверхность капилляра должна быть кондиционирована |
| Температура | Определяет вязкость и кинетику распределения | Повышение T обычно ускоряет миграцию, но может ухудшать разделение из-за снижения вязкости и изменения мицелл | В фарманализе важна термостабилизация (иначе плывут времена и площадь пиков) |
| Тип аналитов | Нейтральные, кислые, основные, амфотерные соединения | MEKC особенно полезна для нейтральных веществ (в обычной КЭФХ они разделяются плохо) | Удобно для смеси примесей и действующего вещества: можно развести близкие по структуре нейтральные компоненты |