В ОСНОВЕ АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ЛЕЖИТ
1) разделение ионов определяемого вещества на поверхности ионообменников
2) взаимодействие определяемого вещества с лигандом, иммобилизованным на инертном носителе (+)
3) распределение веществ в адсорбенте за счет физического взаимодействия
4) взаимодействие определяемого вещества с газом-носителем

Верным является вариант 2: при аффинной хроматографии молекула аналита из раствора избирательно связывается с лигандом, который заранее ковалентно пришит к инертному носителю (гелю, пористым шарикам и т.п.). Лиганд имитирует природную мишень вещества (например, субстрат, кофермент, рецептор), поэтому в колонке задерживаются именно те молекулы, которые к нему специфично прилипают , а все остальное вымывается элюентом. Затем связанное вещество элюируют, изменяя условия (pH, ионную силу, добавляя конкурентный субстрат), и получают высокоочищенный препарат — что критично, например, при выделении белков, ферментов, гормонов и антител в фармацевтическом производстве.

Элемент аффинной хроматографии	Краткое описание	Примеры	Значение для фармации
Инертный носитель	Матрица, на которую ковалентно закрепляют лиганд	Сефароза, агароза, пористые полимеры	Обеспечивает механическую прочность и проницаемость колонки
Лиганд	Молекула, специфично связывающая целевое вещество	Субстраты ферментов, коферменты, антигены, антитела	Определяет селективность очистки лекарственного вещества
Аналит (мишень)	Молекула, которую нужно выделить или очистить	Ферменты, моноклональные антитела, рекомбинантные белки	Получение высокоочищенных API биотехнологического происхождения
Стадия сорбции	Связывание аналита с лигандом на поверхности носителя	Загрузка раствора белка на колонку с иммобилизованным лигандом	Избирательное удерживание нужного компонента из сложной смеси
Стадия отмывки	Удаление несвязавшихся и слабосвязанных примесей	Промывка буфером исходного состава	Снижение уровня механических и белковых примесей
Стадия элюции	Разрушение связи лиганд–аналит изменением условий	Изменение pH, ионной силы, добавление конкурирующего субстрата	Выделение целевого вещества в виде очищенной фракции
Специфичность	Способность избирательно связывать именно нужную молекулу	Антитело к конкретному антигену на колонке	Обеспечивает высокую степень очистки за один хроматографический шаг
Применение	Биотехнологическое и фармацевтическое производство	Очистка инсулина, моноклональных антител, факторов свертывания	Качество и безопасность биофармацевтических препаратов