В ОСНОВЕ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ЛЕЖИТ СПОСОБНОСТЬ ВЕЩЕСТВ
1) преломлять проходящий свет
2) вращать плоскость поляризованного света
3) поглощать электромагнитное излучение (+)
4) проводить электрический ток
В спектрофотометрии мы судим о количестве вещества по тому, насколько сильно образец ослабляет проходящее через него электромагнитное излучение на выбранной длине волны. Чем выше молярная экстинкция и концентрация аналита, тем больше свет поглощается и тем выше оптическая плотность (А), связанная с концентрацией по закону Бугера–Ламберта–Бера: A = ε·b·c. Это позволяет точно измерять ионные формы лекарственных веществ, примеси, стабилизаторы и продукты распада, если у них есть характерные полосы поглощения.
Поэтому верным является вариант: 3) поглощать электромагнитное излучение (+) . Преломление, вращение плоскости поляризации и электропроводность относятся к другим физическим методам анализа (рефрактометрия, поляриметрия, кондуктометрия) и не лежат в основе спектрофотометрических измерений.
| Параметр | Что означает | Типичные значения | Замечания по фарм-анализу |
|---|---|---|---|
| Диапазон | Область длин волн измерений | УФ: 190–380 нм; Видимый: 380–780 нм | Выбор зависит от спектра поглощения аналита и матрицы |
| Длина волны (λ) | Точка максимума поглощения (λmax) | Индивидуальна для вещества | Работа у λmax повышает чувствительность и селективность |
| Оптическая плотность (A) | Логарифм отношения I0/I | Линейно с c при малых А (обычно 0.2–1.0) | Слишком большие A требуют разведения образца |
| Путь кюветы (b) | Толщина слоя раствора | 1.0 см (стандарт) | Должен быть постоянен для корректной калибровки |
| Молярная экстинкция (ε) | Способность вещества поглощать свет | 102–105 Л·моль−1·см−1 | Определяет предельную чувствительность метода |
| Источник света | Освещение в нужном диапазоне | D2-лампа (УФ), галогенная (видимый) | Стабильность источника влияет на шум и дрейф |
| Детектор | Преобразование света в сигнал | ФЭУ, фотодиоды, ПЗС-линейки | Выбирают по чувствительности и скорости |
| Разрешение (щель) | Способность разделять близкие пики | 0.5–2 нм | Узкая щель ↑селективность, но ↓интенсивность |
| Бланк/фон | Растворитель и реагенты без аналита | Идентичная матрица | Компенсация фонового поглощения и мутности |
| Применения | Что обычно измеряют | Идентификация, количественный анализ | Дозировка АФИ, контроль примесей и стабильности |