ВИДОМ ЭЛЕКТРОФОРЕЗА, КОТОРЫЙ ПРОВОДЯТ В ЗАКРЕПЛЕННОЙ СРЕДЕ, ЯВЛЯЕТСЯ
1) вторичный
2) первичный
3) фронтальный
4) зональный (+)
Правильный ответ: 4) зональный. Этот метод выполняют в закреплённой (твердой) среде — чаще всего в геле агарозы или полиакриламида. Белки, нуклеиновые кислоты и другие заряженные частицы движутся в электрическом поле и разделяются на зоны по их электрофоретической подвижности, зависящей от заряда, размера и формы молекул, а матрица геля препятствует конвекции и диффузии, обеспечивая чёткие полосы.
С практической точки зрения фармацевта зональный электрофорез удобен для качественного и полуколичественного контроля белков сыворотки, анализа чистоты биополимеров и проверки результатов очистки. Первичный/вторичный к типам среды не относится, а фронтальный электрофорез выполняют без фиксированной матрицы, поэтому именно зональный соответствует критерию проведения в закреплённой среде.
| Метод | Среда | Что разделяет | Принцип | Типичные применения | Преимущества | Ограничения |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Зональный (верный) | Закреплённая: гели агарозы, ПААГ | Белки, ДНК/РНК | Различие в заряде/размере → разные скорости в геле | Электрофореграмма белков сыворотки, контроль чистоты, генотипирование | Чёткие полосы, высокая разрешающая способность | Требует приготовления/подбора геля и буфера |
| Свободный (в растворе) | Жидкая буферная система (без матрицы) | Малые ионные виды | Миграция в объёме без фиксации | Аналитика небольших ионов | Простая постановка | Размытые границы, низкая воспроизводимость зон |
| Фронтальный | Обычно безгелевая система | Смеси электролитов/коллоидов | Наблюдение фронтов проводимости | Оценка подвижности ионов | Быстрое ориентировочное разделение | Невысокое разрешение, нет устойчивых зон |
| Изоэлектрическое фокусирование | Гель с pH-градиентом | Белки по pI | Миграция до точки pI → фокусирование в узкие полосы | Тонкое разделение изоформ белков | Высочайшая селективность по pI | Сложная подготовка, чувствительно к условиям |
| Капиллярный электрофорез | Кварцевый капилляр, буфер | Ионы, малые молекулы, пептиды | Электроосмотический поток + электрофоретическая подвижность | Фармацевтическая аналитика, контроль примесей | Высокая эффективность, малая проба, автоматизация | Требует специализированного оборудования |
| Иммуноэлектрофорез | Гель (обычно агар) | Белки с учётом иммунной специфичности | Электрофорез + диффузия антител → преципитационные дуги | Выявление аномалий иммуноглобулинов | Специфичность за счёт антител | Длительность, полуколичественный характер |
| Двумерный (2D-электрофорез) | Гели (IEF → SDS-PAGE) | Комплексные смеси белков | Сначала по pI, затем по мол. массе | Протеомика, детекция изоформ/модификаций | Максимальное разрешение | Трудоёмкость, требования к оборудованию |
